آزمایش پساب

آزمایش نمونه برای اندازه‌گیری RNA SARS-CoV-2 در فاضلاب شامل آماده‌سازی نمونه، غلظت نمونه، استخراج RNA و روش‌های اندازه‌گیری RNA است. روش‌هایی که در هر مرحله انتخاب می‌شوند باید برای استفاده با فاضلاب که از نظر شیمیایی و بیولوژیکی مخلوطی پیچیده و متغیر است، تنظیم شوند. ارزیابی عملکرد این روش های پردازش نمونه فاضلاب با استفاده از کنترل های آزمایشگاهی مناسب. پروتکل‌های ایمنی زیستی مناسب برای پردازش نمونه‌های فاضلابی که ممکن است حاوی SARS-CoV-2 باشند، باید دنبال شوند.

آماده سازی نمونه آزمایش پساب:

ذخیره سازی و تهیه صحیح نمونه های فاضلاب به اطمینان از دقیق بودن انداز گیری های فاضلاب RNA SARS-CoV-2 کمک می کند.

ذخیره سازی:

نمونه ها را بلافاصله پس از جمع آوری در دمای 4 درجه سانتیگراد در یخچال نگهداری کنید و در صورت امکان آنها را ظرف 24 ساعت پردازش کنید تا تخریب RNA SARS-CoV-2 کاهش یابد و کاربرد نظارت افزایش یابد. اگر نتوانید نمونه‌ها را ظرف 24 ساعت پس از جمع‌آوری پردازش کنید، باید یک کنترل بازیابی ماتریس را قبل از یخچال در دمای 4 درجه سانتی‌گراد یا منجمد کردن آن در -20 درجه سانتی‌گراد یا -70 درجه سانتی‌گراد در داخل نمونه قرار دهید.

همگن سازی:

هر دو نمونه پساب مایع و لجن اولیه باید قبل از حذف بخش هایی از فاضلاب جمع آوری برای پردازش پایین دست، به خوبی مخلوط شوند. با معکوس کردن نمونه ها چندین بار (برای نمونه های مایع) یا با اختلاط مکانیکی مخلوط کنید. نمونه‌های همگن می‌توانند شامل روش‌هایی برای شکستن جامدات فاضلاب و جداسازی ذرات ویروس مانند فراصوت شوند.

شفاف سازی نمونه:

شفاف سازی نمونه های فاضلاب مایع با حذف مواد جامد بزرگ می تواند به مراحل بعدی غلظت مبتنی بر فیلتراسیون کمک کند اگر نمونه ها برای غلظت نمونه استفاده شوند. با این حال، حذف جامدات RNA SARS-CoV-2 چسبید به آن جامدات را نیز حذف می کند. می توانید نمونه ها را با استفاده از فیلترهایی با اندازه منافذ بزرگ (5 میکرومتر یا بزرگتر) یا سانتریفیوژ شفاف کنید.